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DYCP琼脂糖水平电泳仪操作规范与维护要点

更新时间:2025-12-28      浏览次数:2
  实验室里,一台DYCP电泳仪正平稳运行,凝胶上条带清晰分离——这看似简单的操作背后,实则暗藏诸多细节。从凝胶浓度的精准配比,到电泳电压的毫厘把控,任何一个环节的疏忽都可能导致实验失败。本文将拆解DYCP琼脂糖水平电泳仪的核心操作步骤,手把手教你避开常见误区,让实验效率与结果质量双提升。
 

 

  一、设备检查与试剂准备
  操作前需确认DYCP琼脂糖水平电泳仪主体无裂纹、电极无氧化,缓冲液槽无渗漏,槽盖与电极接线接触良好。推荐搭配电源,确保电压调节功能正常。试剂需使用新鲜配制的1×TAE或1×TBE缓冲液,核酸染料需按说明书比例稀释,避免使用过期或受污染试剂。
  二、凝胶制备与参数选择
  根据DNA片段大小选择琼脂糖浓度:大片段(>10kb)用0.8%凝胶,中片段(1-10kb)用1.0%-1.2%,小片段(<1kb)用1.5%-2.0%。以DYCP-31DN为例,称取对应质量琼脂糖加入锥形瓶,加入缓冲液后微波炉中高火加热30秒,摇匀后继续加热20秒至溶液透明无颗粒。冷却至50-60℃时加入染料,倒入胶室托盘(厚度3-4mm),室温静置25-30分钟至全部凝固。
  三、上样与电泳参数设置
  凝胶凝固后,垂直拔出梳子,将胶板放入电泳槽,确保加样孔靠近负极。倒入缓冲液至液面没过凝胶2-3mm,用移液器吸取预混6×Loading Buffer的样品,斜角45°对准加样孔中心缓慢推液,每孔上样量建议10-15μL。仪器支持高通量上样,可按从左到右顺序依次加样,边缘孔加入DNA Marker作为分子量对照。盖好槽盖后连接电极线,开启电源选择恒压模式,电压设置为50-70V,电泳时间40-60分钟,待溴酚蓝迁移至凝胶2/3处时停止。
  四、结果观察与设备维护
  电泳结束后关闭电源,取出凝胶置于凝胶成像系统,调整紫外灯波长至254nm或302nm,拍摄并保存图像。实验后需用蒸馏水冲洗电泳槽、胶室托盘和梳子,去除残留凝胶,晾干后存放于干燥通风环境。定期检查电极状态,若出现氧化生锈,用400目砂纸打磨确保电场均匀稳定。

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